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一步法合成高得率、低雙鏈RNA(dsRNA)的加帽mRNA
TriLink的CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT 試劑盒包含通過體外轉(zhuǎn)錄 (IVT) 生產(chǎn) mRNA 所需的所有組分,并采用 CleanCap® 共轉(zhuǎn)錄加帽技術(shù)。該試劑盒整合了創(chuàng)新的 mRNA 技術(shù),可顯著提升實驗結(jié)果。
試劑盒中的核心組分CleanCap AG (3′ OMe)可產(chǎn)生 Cap 1 mRNA,其體內(nèi)活性優(yōu)于由傳統(tǒng)共轉(zhuǎn)錄加帽方法(如 ARCA)產(chǎn)生的 Cap 0 mRNA。此外,與酶法加帽相比,使用 CleanCap AG (3′ OMe) 進行加帽,可提供更簡化和高效的 mRNA 生產(chǎn)流程。
三大優(yōu)勢:
1?? 超過95%的加帽效率
采用 CleanCap® AG (3' OMe) (CleanCap® AG 的改良版本)進行共轉(zhuǎn)錄加帽,用于提高蛋白表達,可一步高效地生成帶有Cap 1結(jié)構(gòu)的 mRNA 產(chǎn)物。
2?? mRNA產(chǎn)量提升高達2倍
按照 TriLink 的 CleanScript® IVT 針對高產(chǎn)率和低雙鏈 RNA (dsRNA) 進行優(yōu)化過的方案合成mRNA,其產(chǎn)量可比標(biāo)準(zhǔn) IVT 方案提升高達兩倍,達到 10 mg/mL。
3?? dsRNA降低幅度高達85%
試劑盒中的酶混合物包含新型的 CleanScribe™ RNA 聚合酶,替代野生型 T7 RNA 聚合酶,可進一步減少 dsRNA 的形成。
最-大-化 mRNA 產(chǎn)量,同時最小化 dsRNA 形成
圖一:按照 TriLink 的 CleanScript IVT 方案,在四種構(gòu)建體上獲得的 mRNA 產(chǎn)量均顯著高于標(biāo)準(zhǔn)方案,提升幅度高達兩倍,達到約10 mg/mL。
圖二:在 IVT 中使用 CleanScribe RNA 聚合酶替代野生型 (WT) T7 RNA 聚合酶后,通過 ELISA 檢測三種 mRNA 構(gòu)建體(無論是否含有 N1-甲基假尿苷 (N1MePsU) 修飾)的 dsRNA 形成量均顯著降低,可減少高達85%。
使用TriLink的IVT試劑盒,可獲得更穩(wěn)定的 mRNA
TriLink 的CleanCap AG (3' OMe) CleanScript IVT 試劑盒提供低 dsRNA 水平的 mRNA,可以最-大程-度減少由先天免疫系統(tǒng)激活引起的不良炎癥反應(yīng),并增強蛋白表達。
圖三:在 A549-Dual® 細(xì)胞中,使用 CleanScribe RNA 聚合酶比使用 WT T7 RNA 聚合酶合成的 mRNA 引發(fā)的免疫應(yīng)答更低。Poly(I:C) 和 3p-hpRNA 為陽性對照。
圖四:使用CleanScribe RNA聚合酶合成的mRNA在A549細(xì)胞中表達的蛋白高于使用野生型T7 RNA聚合酶合成的mRNA。
訂購信息:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 反應(yīng)規(guī)格 |
CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit | K-7413-25 | 25x100μL 或 125x20μL |
試劑盒中組分信息:
Component | Concentration | Amount |
CleanCap® Reagent AG (3′ OMe) | 100mM | 10µmol |
Adenosine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Cytidine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Guanosine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Uridine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
N1-Methyl-Pseudouridine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
AG CleanScribe™ RNA Polymerase Mix | 10X | 250µL |
10X AG CleanScript™ IVT Buffer | 10X | 1mL |
FLuc Control Plasmid | 0.5µg/µL | 25µg |
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