某些凝集素可與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的糖鏈特異性結(jié)合，因而常被用于血管的標(biāo)記和可視化觀察。雖然可以用這些凝集素直接對(duì)組織切片進(jìn)行染色，但也可以通過(guò)靜脈注射帶有標(biāo)記的凝集素，這樣可以?xún)?yōu)先對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行染色，并觀察凝集素在血管中的滲漏情況，該操作可以在活體動(dòng)物或離體組織上進(jìn)行。番茄凝集素（Lycopersicon esculentum (Tomato) lectin，LEL）對(duì)不同小鼠組織的染色就是一個(gè)優(yōu)秀案例，具體可參閱Robertson 等人的研究報(bào)告(Ref.89)。由于不同物種內(nèi)皮細(xì)胞上的糖鏈存在差異，建議針對(duì)您感興趣的物種選擇合適的凝集素（如番茄凝集素常用于嚙齒類(lèi)動(dòng)物），以獲得最-佳染色信號(hào)。有關(guān)用于血管成像的不同試劑的更多信息，請(qǐng)參閱 Lokmic 和 Mitchell的研究報(bào)告 (Ref.90)。

異常的血管形態(tài)是腫瘤的特征之一，也是對(duì)整個(gè)腫瘤提供分子或細(xì)胞治療的障礙（Ref.91)。Park等人設(shè)計(jì)了一種通過(guò)抗體遞送藥物使腫瘤血管系統(tǒng)正常化的治療策略。他們通過(guò)在神經(jīng)膠質(zhì)瘤小鼠模型中，將LEL進(jìn)行血管灌注后進(jìn)行染色，證明了藥物對(duì)腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)作用（Ref.29）。

 精選文獻(xiàn) 

• Imaging host vascularization of engrafted tissues (Ref. 5)

• Analysis of vascular permeability and visualization of microvessels (Ref. 23)

• Quantifying tissue vascularization for tissue engineering (Ref. 33)

• Detection and quantification of tumor angiogenesis (Ref. 21)

• Determination of drug delivery on vascular organization (Ref. 29)

• Vascular endothelial staining standard for methodology comparison (Ref. 27)

 實(shí)驗(yàn)流程概覽 

制備凝集素溶液

• 使用無(wú)菌PBS將凝集素溶解或稀釋至0.5-2ug/ml；

• 注射前，將試劑平衡至室溫。

注射

• 使用適當(dāng)?shù)姆椒s束動(dòng)物，為注射做準(zhǔn)備；

• 觀察并準(zhǔn)備注射部位，即尾側(cè)靜脈；

• 靜脈注射凝集素溶液(100-200ul)；

• 輕輕按壓以封閉注射部位。

處死*

• 注射后15-30分鐘處死動(dòng)物。

樣本制備、成像

• 收集所需的組織進(jìn)行分析和處理，以便后續(xù)圖片捕獲；

• 通過(guò)所需技術(shù)捕獲圖像。

*所有動(dòng)物處理方法和技術(shù)都必須遵守 IACUC((Institutional Animal Care and Use Committee)) 的指導(dǎo)方針，并符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的方案。

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